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现有冻存方法存在的问题 :
1 、DMSO对细胞存在一定的毒性 ,用量受到限制 ,降低或者不使用DMSO ,寻找其它替代物是最好的选择 。
2 、血清 ,即使是纯化得到的白蛋白 ,由于其动物来源的特性 ,会极大增加带来病毒等感染物质的可能 。而且 ,血清来源受限 ,价格昂贵 ,所以其使用也必然会受到越来越多的限制 。因此 ,寻找替代血清的非渗透性保护剂也显得尤为必要 。
3 、目前 ,最成熟和最稳定的冻存细胞技术是将加有保护剂的细胞悬液置于-196℃液氮中 ,这样可以使细胞暂时脱离生长状态而保持细胞的特性 ,在需要的时候经过复苏程序 ,使得细胞重新生长增殖以用于实验 。细胞储存在-196℃液氮中 ,理论上储存时间是无限的 ,但是液氮冻存步骤繁琐 ,需要经过程序降温 ,如先将冷冻管置于4℃冰箱10分钟 ,然后移至-20℃冰箱30分钟 ,再移至-80℃冰箱保存16-18个小时(或隔夜) ,最后才移至液氮罐中进行长期的储存 。(其中需要注意的是-20℃条件下不可超过1个小时 ,以防止冰晶过大 ,造成细胞大量的死亡 。)
尊龙凯时人生就是博z6com科学家团队在细胞冻存领域进行了大量研究工作 ,分别于2015年研发了 “Cellregen无血清细胞冻存液”(货号 :CF0101) 和2020年研发了 “无血清低DMSO细胞冻存液”(货号 :CF0201;专利申请号 :202010307890.6) 。这两款冻存液均是不含血清 ,含DMSO ,非程序降温 、可-80℃长期冷冻保存的通用型细胞冻存液 ,区别在于“Cellregen无血清细胞冻存液”(货号 :CF0101)的DMSO含量为10% , “无血清低DMSO细胞冻存液”(货号 :CF0201)DMSO的含量为5% ,产品均获得了广大科研工作者的喜爱 。
鉴于某些类型的细胞对DMSO敏感 ,使用含DMSO的细胞冻存液可能会影响细胞的功能 ,尊龙凯时人生就是博z6com继续研究工作 ,开发出一款无血清 、无DMSO 、无毒性 、非程序降温 、-80℃可长期冷冻保存的冻存液体系 :CRD0无血清无DMSO细胞冻存液(货号 :CF0301) 。
产品特点 :
☆ 高安全性 ,不含血清及动物源成分 ,病毒 、霉菌和支原体等污染可能性低 ,各批产品之间有更高的产品质量一致性 。
☆ 无DMSO ,对细胞无潜在的毒性作用 。
☆ 细胞存活率高 ,无批次差异 。
☆ 完全冻存液配方 ,可直接使用 ,方便简捷 。
☆ 可直接存放于-80℃冰箱冻存 ,无需经过费时的程序降温过程(省时 、省力 、省钱) ,不需要采用程序降温仪 ,更不需要放置在-196℃液氮 。
☆ 可原位冻存 ,比如杂交瘤细胞的亚克隆 ,可以大规模减少工作量 ,避免污染 。
CRD0无血清无DMSO细胞冻存液冻存效果 :
图1. 3T3细胞复苏后细胞状态图 图2. ATDC5细胞复苏后细胞状态图
3T3细胞存活率>90% ATDC5存活率>90%
图3 小鼠脾脏T细胞复苏后细胞凋亡图 三个批次复苏率均>95% ,且批次间冻存效果无明显差异
货号 |
产品名称 |
规格 |
目录价格 |
CF0301 |
CRD0 无血清无DMSO细胞冻存液 |
100 mL |
890 |
CF0302 |
CRD0 无血清无DMSO细胞冻存液 |
500 mL |
3890 |
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